JAPON (Carassius auratus) BALIKLARINDAN İZOLE VE İDENTİFİYE EDİLEN
AEROMONAS HYDROPHILA, A. CAVIAE VE A. SOBRIA TÜRLERİNİN
ANTİBİYOTİK HASSASİYETLERİ, HEMOLİTİK AKTİVİTELERİ VE SİDEROFOR
ÜRETİMLERİ ÜZERİNE BİR ÇALIŞMA
Jale KORUN, Hatice BETÜL TOPRAK
AKDENİZ ÜNİVERSİTESİ SU ÜRÜNLERİ FAKÜLTESİ
ÖZET
Çalışmada hasta japon (Carassius auratus) balıklarından izole edilen Aeromonas
hydrophila, A. caviae ve A. sobria suşlarının siderofor üretimleri, hemolitik aktiviteleri ve
antibiyotik hassasiyet ve / veya direnç durumları değerlendirilmiştir. Japon balıkları
Antalya da ki ticari bir işletmeden temin edilmiştir. Laboratuar çalışmaları Akdeniz
Üniversitesi Su Ürünleri Fakültesinde gerçekleştirilmiştir. Balıklar dış yönden
incelendikten sonra steril koşullarda otopsileri yapılmıştır. Dış ve iç klinik bulgular
kaydedilmiştir. Dalak, karaciğer ve böbrekten Beyin Kalp İnfüzyon Agar (BHIA) içeren
besiyerlerine ekimler yapıldıktan sonra besiyerleri 22 ˚C de 48 saat süre ile inkübe
edilmiştir. Hasta balıklarda (sekiz adet; 80-120 g) solgun solungaçlar, yüzgeçlerde
erime, karın kısmında şişkinlik gözlenmiştir. İnternal olarak, böbrek ve karaciğerler
solgun olup, genişlemiş dalak ve ascites tespit edilmiştir. Morfolojik, fizyolojik ve
biyokimyasal testler iç organlardan alınan örneklerden izole edilen kolonilerin saf
kültürlerinin fenotipik özelliklerini tespit etmek için uygulanmıştır. İzole edilen bakteriler
Aeromonas hydrophila, A. caviae ve A. sobria olarak identifiye edilmiştir. Bakteri
suşlarının hemolitik aktiviteleri ile siderofor üretimlerinin pozitif olduğu bulunmuştur.
Antibiyotik hassasiyet sonuçlarına göre, suşların hepsi ampicillin ve tetracycline’e
direnç göstermiştir.
Anahtar kelimeler: Carassius auratus, hareketli aeromonaslar, antibiyotik hassasiyeti,
siderofor, hemolitik aktivite.
GİRİŞ
Bakteriyel enfeksiyonların balık sağlığı ve ülke ekonomisine olan etkileri değişmekle
birlikte, bu etki ciddi boyutlarda da olabilmektedir. Bazı enfeksiyonlar, balıklarda yüksek
oranda ölümlere neden olurken, bazıları kronik, düşük seviyede kayıplara yol açmakta,
bir kısım bakteriyel enfeksiyonlar ise balıklarda dış yönden hoş olmayan görüntülere
neden olarak pazarlanabilmelerine engel olabilmektedir (Stoskoph, 1993). Balıklarda
bakteriyel enfeksiyonlara neden olan türler arasında Aeromonas cinsi bakteri türleri de
bulunmaktadır. Aeromonadlar, karakteristik olarak tatlı su bakterileri olup hareketli
türleri Aeromonas hydrophila, A. caviae ve A. sobria akvatik hayvanların mikrobiyal
florasının bileşenleri olmakla birlikte, koi, sazan gibi tatlı su balık türlerinde de
hemorajik septisemiye neden olurlar (Aoki, 1999; Noga, 1996).
Konak içinde, bakteriyel enfeksiyonun devamlılığı patojenin konaktan demir gibi
besinleri elde etme yeteneğine bağlıdır (Payne, 1993; Guerinot, 1994; Finlay ve
Falkow, 1997; Mathew ve ark., 2001). Demir, bakterinin koloni oluşturması ve
devamlılığı için önemli olup, patojen bakteri türlerinin çoğu siderofor üretir ve sideroforFe+3
kompleksini hücre içine nakleder (Mietzner ve Morse, 1994; Ferguson ve ark.,
1998). Bununla birlikte, demir metabolizması septisemi oluşumu için tek sınırlayıcı
faktör olmayabilir (Thune ve ark., 1993; Mietzner ve Morse, 1994; Mathew ve ark.,
2001). Patojenik suşlara sahip bakteriyel türler genel olarak hemolitik aktivite
göstermektedir. Bu özellik, çoğu kez patojenik ve patojenik olmayan suşları ayırt edici
bir grup özellik arasında yer almaktadır (Horne, 1982).
Hareketli Aeromonas türlerine ilgi gösterilmesinin nedeni; balık yetiştiricilik ortamlarında
kayıplara yol açmaları, balık, deniz kabukluları, kurbağa ve insan dahil olmak üzere
geniş bir konak dağılımına sahip olmalarıdır (Austin ve Adams, 1996; Janda ve Abbott,
1996; Uzel ve Uçar, 2000).
Bu çalışmanın amacı; hasta japon balıklarından izole ve identifiye edilen Aeromonas
hydrophila, A. sobria ve A. caviae suşlarının in vitro koşullarda siderofor üretimlerini,
hemolitik aktivitelerini ve antibiyotik hassasiyet ve/veya direnç durumlarını
değerlendirmektir.
japon balığı antibiyotik direnci |
TARTIŞMA
Aeromonas hydrophila ve diğer hareketli aeromonadlar çoğu kez balıklardaki bakteriyel
hemorajik septisemiler ve ülser durumları ile alakalı organizmalar olarak ifade edilir
(Cipriano, 2001). Bu çalışmada hasta balıklarda gözlenen solgun solungaçlar, karın
kısmında şişkinlik, karaciğer ve böbreklerin solgun oluşu, bağırsağın hemorajik ve gıda
yönünden boş olması ayrıca sarı renkli sıvı ile dolu olması, ascites gibi bulgular diğer
araştırıcıların bildirdiği bulgulara benzerlik göstermiştir (Huizinga ve ark., 1979; Austin
ve Austin, 1999).
Aeromonas cinsi, Gram-negatif, okdidaz ve katalaz pozitif, heterotrofik, halofilik
olmayan ve fakültatif olarak anaerobik bakteri türlerini içerir (Holmes ve ark., 1996;
Valera ve Esteve, 2002). A. hydrophila, A. caviae ve A. sobria mezofilik hareketli
aeromonad türlerinden olup, A. sobria L-arjinin ve L-arabinoz’u kullanmaması ile diğer
iki türden ayırt edilirken, A. hydrophila ve A. sobria ise sisteinden H2S üretmesi ve
glukozun fermentasyonundan gaz üretmesi ile A. caviae’den ayırt edilir (Valera ve
Esteve, 2002; Cipriano, 2001; Popoff, 1994; Frerichs, 1993). Mevcut çalışmada hasta
japon balıklarından izole edilen ve A. hydrophila olarak identifiye edilen 8 suşun arjinin
dihidrolaz pozitif oldukları, glukoz fermentasyonundan gaz oluşturdukları, sisteinden
H2S ürettikleri tespit edilmiştir. Bu bulgular, diğer araştırıcıların bulgularına benzerlik
göstermiştir (Cipriano, 2001; Aoki, 1999; Popoff, 1994). Çalışmada izole edilen altı
suştan beş’i, H2S üretimleri negatif ve glukozun fermentasyonundan asit
oluşturmadıkları için A. caviae olarak identifiye edilirken, bir suş ise sisteinden H2S
üretmesi ve glukozun fermentasyonundan gaz oluşturması ve arabinozu kullanmaması
sebebi ile A. sobria olarak identifiye edilmiştir. Bu bulgular, Cipriano (2001), Popoff
(1994) tarafından bildirilen bulgulara benzerlik göstermiştir.
Çolakoğlu ve ark. (2005), Valera ve Esteve (2002), Aeromonas türlerinin TCBS de
gelişme gösterdiklerini ve sarı renkli koloni oluşturduklarını bildirmiştir. Bu çalışmada da
izole ve identifiye edilen hareketli Aeromonas suşları, TCBS de gelişme göstererek,
sarı renkli koloniler üretmişlerdir. Ancak, % 1.5 NaCl eklenerek hazırlanan TCBS
besiyerinde ise bakterilerin üremedikleri tespit edilmiştir.
Hareketli aeromonadlarda beta-hemolizin’in virülens faktörü olduğu bildirilmiştir
(Majeed ve MacRae, 1994). Bu çalışmada hasta balıklardan izole ve identifiye edilen
11 A. hydrophila, 1 A. sobria ve 3 A. caviae suşunun %5 koyun kanı içeren Trypticase
Soy Agar da beta-hemoliz meydana getirdikleri tespit edilmiştir. Elde edilen sonuçlar,
diğer araştırıcıların bulgularına benzerlik göstermiştir (Hatha ve ark., 2005; Cipriano,
2001). Janda (1991), Santos ve ark. (1988) Aeromonas türlerinin siderofor ürettiğini
781
bildirmiştir. Mevcut çalışmada A. hydrophila, A. sobria ve A. caviae suşlarının CAS
agarda siderofor üretimlerinin pozitif olduğu tespit edilmiştir.
Çalışmada, tüm hareketli Aeromonas suşlarının Joseph ve Carnahan (1994)’nın
belirttiği gibi ampicillin’e dirençli oldukları gözlenmiştir. Bununla birlikte, çalışılan bütün
suşların tetracycline’e dirençli oldukları da tespit edilmiştir. Chang ve Bolton (1987) A.
hydrophila’nın Asya izolatlarının Avustralyadan izole edilenlere göre tetracycline’e daha
yüksek oranlarda dirençli olduklarını bulmuştur. Bu durum, antibiyotik ilave edilmiş
yemlerin sürekli kullanımlarının doğal ortamlardaki dirençli bakteriyel patojenlerin daha
fazla yayılmasını teşvikle sonuçlanabilmektedir (Hatha ve ark., 2005; Redmayne,
1989).
SONUÇ
Bu çalışmanın sonucunda; hasta japon balıklarından izole ve identifiye edilen
Aeromonas hydrophila, A. sobria ve A. caviae suşlarının in vitro koşullarda siderofor
üretimlerinin, hemolitik aktivitelerinin pozitif olduğu ve antibiyotik hassasiyet durumları
değerlendirildiğinde ampicilline’e direnç göstermekle birlikte, tetracycline’de dirençli
oldukları bulunmuştur.
Makalenin tamamı için: akuademi.net
Hiç yorum yok :
Yorum Gönder
Üye olmadan yorum yazmak için yorumlama biçimini "adı" ya da "anonim" olarak seçebilirsiniz.